Casting

Le rôle de Selene est confiée à l'actrice britannique Kate Beckinsale, qui s'est faite mondialement connaître avec le film Pearl Harbor -2001 (J'ai detesté ce navet!!!) après plus de dix ans de carrière menée au cinéma, au théâtre et à la télévision.Au départ, Beckinsale ne « ne voulait même pas lire le scénario pour la simple raison que c'était un film de vampires » selon Wiseman. L'agent de l'actrice a tout de même envoyé le script à la jeune femme avec les dessins du réalisateur. C'est grâce aux dessins qu'elle a finalement acceptée d'incarner Selene.(elle aurait vraiment eu tort de refuser)

« Len avait fait des dessins fantastiques représentant Selene affrontant des Lycans. C'était frais, original et c'est ce qui m'a donné envie de lire le scénario [...] Ce n'est pas une BD où le personnage principal défie les lois de la pesanteur et saute partout. Elle est faite de chair et de sang et bien que très puissante, elle peut souffrir.C'est un personnage solitaire qui n'a qu'un seul objectif dans cette guerre : détruire tous les Lycans afin de venger le massacre de sa famille. Son appétit de vengeance est sa force, et toute sa vie tourne autour de ça. Sa croisade commence à perdre son sens lorsqu'elle rencontre Michael.C'est intéressant de jouer un personnage qui va être déstabilisé, qui devra changer sa vision des choses et sa façon d'être. »

— Kate Beckinsale, interprète de Selene

Wiseman dit de l'actrice qu'« elle est passionnée par le projet » et que « toutes ses idées s'accordaient parfaitement avec la direction que nous souhaitions donner au personnage et elle en a vraiment amélioré plusieurs aspects », McBride ajoute qu'elle « est vraiment intense dans ce film [...]elle est magnifique et a réalisé la plupart des cascades elle-même.C'est tellement différent de ce qu'elle faisait jusqu'à présent.(Tu l'as dit!) Elle a littéralement donné vie à Selene , l'a arrachée de la page et en a fait un personnage sexy, cool et compliqué. »

Pour incarner le personnage principal masculin, Michael Corvin, le rôle fut confié à l'acteur Scott Speedman, révélé par la série Felicity.C'est l'attitude de l'acteur envers le scénario qui a convaincu le réalisateur : « Scott a tout pris avec extrêmement de sérieux et voulait avoir une attitude laplus réaliste possible», sa partenaire ajoutant qu'elle croit que « Len attire les gens qui sont passionnés et qui sont dans cette aventure pour de bonnes raisons."

Les autres rôles importants, celui de Viktor, chef des Vampires, et de Lucian, chef des Lycans, sont donnés respectivement à Bill Nighy et à Michael Sheen, qui était au moment du tournage le compagnon de Kate Beckinsale depuis 1995, et avec laquelle il a eu une fille.